近日，guowuyuan發(fā)布：全國(guó)所有二級(jí)綜合醫(yī)院都要具備核酸采樣和檢測(cè)能力的通知，要求在2020年9月底前，三級(jí)綜合醫(yī)院、傳染病zhuanke醫(yī)院、各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)以及縣域內(nèi)至少1家縣級(jí)醫(yī)院具備核酸采樣和檢測(cè)能力。到2020年底前，所有二級(jí)綜合醫(yī)院具備核酸采樣和檢測(cè)能力。

核酸檢測(cè)技術(shù)在我國(guó)得到逐步的推廣和應(yīng)用，并已成為血液篩選查實(shí)實(shí)驗(yàn)室的重要實(shí)驗(yàn)手段，但因其靈敏度高的特點(diǎn)，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室也容易導(dǎo)致污染，特別是核酸的氣溶膠污染比較嚴(yán)重。如何預(yù)防和處理PCR核酸實(shí)驗(yàn)室污染為本文討論的。

關(guān)鍵詞：分子診斷，核酸檢測(cè)，核酸污染，DNA，RNA，PCR，DNA測(cè)序，原位雜交，SNP，基因芯片，假陽性

核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì)產(chǎn)生假陽性的檢測(cè)結(jié)果，這樣會(huì)對(duì)病人造成誤診，耽誤病情。如任由此情況發(fā)展，會(huì)形成氣溶膠污染而擴(kuò)散，終導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染，嚴(yán)重的會(huì)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，如無備用實(shí)驗(yàn)室，會(huì)造成更大的損失。是否有一種快速的解決方案呢？且看下面。

分子診斷是指利用分子生物學(xué)方法來檢測(cè)樣品中遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化從而做出相應(yīng)診斷的技術(shù)。由于分子生物技術(shù)的發(fā)展，人們生活水平不斷提高記憶對(duì)健康問題更為重視，分子診斷得以迅猛發(fā)展，市場(chǎng)份額快速提高。我國(guó)分子診斷產(chǎn)業(yè)雖然起步較晚，但現(xiàn)已與歐美，日本，新加坡等起步較早的國(guó)家之間的的差距也越來越小。

而由于日常檢測(cè)中要處理大量的不同來源的核酸以及核酸本身難以降解的特性，核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì)產(chǎn)生假陽性的檢測(cè)結(jié)果，這樣會(huì)對(duì)病人造成誤診，耽誤病情。如任由此情況發(fā)展，會(huì)形成氣溶膠污染而擴(kuò)散，終導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染，嚴(yán)重的會(huì)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，如無備用實(shí)驗(yàn)室，會(huì)造成更大的損失。

在與核酸污染長(zhǎng)期抗?fàn)幹?，人們也總結(jié)出了一些預(yù)防和清除核酸污染的方法。對(duì)于預(yù)防，實(shí)驗(yàn)人員一定要不斷改進(jìn)并嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)室操作流程，對(duì)實(shí)驗(yàn)室不同操作進(jìn)行區(qū)域劃分，分裝試劑，定期對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行滅菌，實(shí)驗(yàn)室適當(dāng)通風(fēng)，養(yǎng)成實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行陰陽對(duì)照的好習(xí)慣。

當(dāng)污染已經(jīng)出現(xiàn)，傳統(tǒng)的清除方法包括對(duì)可疑器用稀酸進(jìn)行擦拭或浸泡，紫外線照射，對(duì)反應(yīng)液用DNaseⅠ或內(nèi)切酶進(jìn)行處理等方法。這些方法對(duì)一些微量污染會(huì)有一定效果，但對(duì)污染效果不是很理想，而且紫外線照射會(huì)對(duì)人體造成一定的危害。

污染傳統(tǒng)處理方法：

準(zhǔn)備（1：50）、（1：10）消毒液，75%無水酒精。
2.5.1把STAR上的所有載架都拿出來，用1：50的消毒液進(jìn)行擦拭，待作用五分鐘后用清水沖洗。

2.5.2 SATR內(nèi)部用噴壺噴灑75%無水酒精，底部金屬部分可用1：50的消毒液進(jìn)行擦拭，待酒精完全沉降后，用清水擦拭。

2.5.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作臺(tái)用1：10的消毒液進(jìn)行擦拭，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部用噴壺噴灑1：50的消毒液，等待空氣中的消毒液沉降后，用1：50的消毒液拖地，建議當(dāng)天不用清水擦拭或拖地，待第二天早上來再用清水擦拭拖地。

2.5.4實(shí)驗(yàn)室用的耗材（除用自封袋封好的），能滅菌的，均用備用滅菌鍋進(jìn)行一次滅菌。

2.5.5機(jī)器通道污染的處理，將配置好的消毒液（1：50）代替裂解液，加入裂解液槽里，完成加裂解液的過程，在機(jī)器每次吸取一定量的消毒液后，暫停十分鐘，讓消毒液揮發(fā)到通道內(nèi)部，反復(fù)四次即可，這個(gè)過程中用的槍尖同樣不帶濾芯。后將裂解液槽里的消毒液（1:50）用水洗凈后換上蒸餾水重復(fù)以上程序。（此類方法正常情況下不建議使用，只有在污染去除不了時(shí)才慎重使用。用該方法處理過機(jī)器后，當(dāng)天不再做核酸實(shí)驗(yàn)）。

總之，對(duì)于核酸污染大家一定要給予足夠的重視，提前預(yù)防，不要等到污染已經(jīng)出現(xiàn)才想辦法清除，經(jīng)常在實(shí)驗(yàn)室中配備清除污染的試劑，發(fā)現(xiàn)污染可馬上進(jìn)行處理，相信這樣核酸污染將不再是讓眾多實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題。

注：實(shí)驗(yàn)室的污染不可能一次就清理干凈，需反復(fù)清理驗(yàn)證，直到實(shí)驗(yàn)結(jié)果能被采用為止。

核酸實(shí)驗(yàn)室污染的主要原因有：

1）標(biāo)本污染；2）試劑污染；3）產(chǎn)物污染；4）其他污染。

其解決措施為：其解決措施為：

1）標(biāo)本污染，重新采樣進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估標(biāo)本前處理環(huán)節(jié)；
2）試劑污染，更換新的試劑重新檢測(cè)評(píng)估；
3）設(shè)備污染，設(shè)備整體消毒清潔、維護(hù)；
4）產(chǎn)物污染，全面清潔消毒實(shí)驗(yàn)室、儀器設(shè)備所有實(shí)驗(yàn)有關(guān)用品。一旦發(fā)生污染后，圍繞實(shí)驗(yàn)室尋找污染源分析污染原因耗時(shí)且很繁瑣，所以防止污染重在預(yù)防。

因核酸實(shí)驗(yàn)室污染后極其難以清除，有可能造成實(shí)驗(yàn)室不能使用的風(fēng)險(xiǎn)。但是如果一旦出現(xiàn)核酸實(shí)驗(yàn)室污染，除了上面常規(guī)的消毒清潔方法之外，另外還有一種比較好使而且快速全面的實(shí)驗(yàn)室空間滅菌方法。根據(jù)國(guó)外DNA研究所大量實(shí)踐證明空間熏蒸消毒確實(shí)有效去除核酸污染源，時(shí)間短、、安全、節(jié)省勞動(dòng)力等等優(yōu)點(diǎn)。此空間熏蒸消毒方法為法國(guó)H2O2干霧消毒技術(shù)，整體核酸實(shí)驗(yàn)室覆蓋，無死角，快速分解掉核酸污染源，消毒完后，隨著排風(fēng)即可清除而無殘留，省時(shí)省力。特別適用核酸實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染。

在眾多的H2O2消毒技術(shù)當(dāng)中，據(jù)大數(shù)據(jù)得知，法國(guó)的H2O2干霧消毒技術(shù)（技術(shù)支持：①⑧⑨?②⑧④②③⑦⑨）由oxypharm制造的消毒機(jī)力壓群雄，成為行業(yè)消毒去除PCR實(shí)驗(yàn)室核酸污染的。（并且持久）
法國(guó)歐菲姆H2O2干霧消毒方案的精妙之處在于的解決方案，巧妙利用了特別的干霧設(shè)備+H2O2殺孢子劑（高純低濃度）的配合，組成無懈可擊空間消毒方案，避免了H2O2蒸汽的腐蝕性和解決了擴(kuò)散性問題。

OXY-30000 H2O2消毒器采用到而特殊的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，使得在僅僅輸入電能的情況下，集壓縮、ventur噴射和霧滴內(nèi)外部濺射碎化功能于一體，使液態(tài)殺孢子劑變成氣霧狀態(tài)極微小顆粒噴出，高速極小微粒與空氣接觸后充分氣化，變成氣態(tài)H2O2即為“干霧”。此干霧具備良好的擴(kuò)散性和細(xì)菌殺滅效果。

OXY-30000干霧消毒器的特點(diǎn)為：

1、滅菌效果好，生物指示劑挑戰(zhàn)降低6lg對(duì)數(shù)值，能殺滅環(huán)境中的MRSA、VRE、結(jié)核分枝桿菌、芽孢、病毒和多重耐藥的革蘭陰性菌（鮑曼不動(dòng)桿菌）；

2、活性氫氧基團(tuán)能分解DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物質(zhì)；

3 快速空間滅菌，比起噴霧或熏蒸所需要的時(shí)間更短，實(shí)現(xiàn)更快速的密閉空間滅菌措施，預(yù)防核酸實(shí)驗(yàn)室環(huán)境空氣污染及核酸片氣溶膠污染，及快速去除實(shí)驗(yàn)室核酸污染源；

3、小于3微米干霧氣體，擴(kuò)散性，能擴(kuò)散到每一個(gè)角落，空氣中做布朗運(yùn)動(dòng)，消毒干霧無孔不入，對(duì)付小分子核酸污染源物質(zhì)；

4、消毒干霧相對(duì)一般H2O2穩(wěn)定，自然損耗小，維持的滅菌濃度均勻，基本不受溫度、環(huán)境濕度的影響（真正的干霧才能做到這點(diǎn)）；

5、無色，無殘留，安全可靠，當(dāng)天使用消毒清除污染，當(dāng)天即可使用實(shí)驗(yàn)室，換回?fù)p失。

潤(rùn)聯(lián)環(huán)保致力于核酸實(shí)驗(yàn)室污染預(yù)防與處理多年，引進(jìn)國(guó)外相關(guān)的處理經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合國(guó)內(nèi)PCR實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況，制定了的核酸污染解決方案。法國(guó)歐菲姆H2O2干霧氣體空間消毒去除核酸氣溶膠污染的效果有待您親眼見證，免費(fèi)現(xiàn)場(chǎng)效果測(cè)試。</a>

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