供應(yīng)商 | 北京百奧思科生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司 |
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認(rèn)證 | |
報價 | 面議 |
產(chǎn)地 | 其它 |
品牌 | 其它 |
基本投資額 | 大于100萬 |
關(guān)鍵詞 | 分子檢測,熒光定量PCR,科研實驗室 |
所在地 | 北京海淀固安 |
定量PCR和數(shù)字PCR,然后就遇到各種PCR技術(shù),PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR和ddPCR,有幾個長得好像,怎么區(qū)分呢?今天一舉搞定它。
01、普通PCR
PCR是普通PCR,以雙鏈DNA為模板,以dNTP為底物,特異性地擴增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進行檢測,只能做定性分析。
02、實時熒光定量PCR
qPCR和Real-time PCR是實時熒光定量PCR,以cDNA為模板,以dNTP為底物,對擴增出的DNA進行定量分析。實時熒光定量PCR常用的方法:水解探針法和熒光染料法。
03、逆轉(zhuǎn)錄PCR
RT-PCR 是逆轉(zhuǎn)錄PCR,采用 Oligo(dT) 或隨機引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成 cDNA,再以 cDNA 為模板進行 PCR 擴增,結(jié)果只能定性,不能定量。
04、實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR
RT-qPCR是實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR,是qPCR+RT-PCR的組合,將總RNA或mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后再作為模板,以dNTP為底物,進行qPCR的定量分析。
05、數(shù)字PCR
dPCR是數(shù)字PCR即三代PCR,是一種能夠?qū)崿F(xiàn)核酸定量的檢測技術(shù),基于泊松分布原理將核酸樣品分配到大量立、平行的微反應(yīng)單元(納升級)中,使每個反應(yīng)室中平均只有一個拷貝或者沒有目標(biāo)DNA分子,然后加入熒光信號進行擴增,從而實現(xiàn)靶標(biāo)核酸分子的計數(shù),提高檢測靈敏度和準(zhǔn)確度。
Q
各種PCR的全稱
A:
① 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)
②實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)
③ 逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)
④實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR(Real-time RT-PCR,RT-qPCR)
數(shù)字PCR(Digital PCR,Dig-PCR,dPCR)
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