分散酶II培養(yǎng)基

貨號(hào)：LZ-PYJ4995

英文名稱：Dispase II

產(chǎn)品規(guī)格：100mg|1g

本制品為非無菌Dispase II，來源于Bacillus polymyxa，使用時(shí)需對其除菌處理，用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常用工作濃度為0.6～2.4U/mL。

分散酶II一種非特異性金屬蛋白酶，細(xì)胞生物學(xué)中常用于從不同的組織或器官分離單細(xì)胞，并用于后續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)，如原代細(xì)胞的分離，細(xì)胞傳代等。另外，Dispase II還可用于消除懸浮細(xì)胞培養(yǎng)過程中發(fā)生的細(xì)胞聚集。與其他細(xì)胞生物學(xué)常用蛋白酶(如、膠原酶、鏈霉蛋白酶等)相比，該酶具有以下優(yōu)勢：

一種快速有效且溫和的細(xì)胞消化酶，對細(xì)胞損傷小，且能維持細(xì)胞膜完整性；

來

配制過程中的常見問題分析：

01 培養(yǎng)基顏色不正確

（1）含有酸堿指示劑的培養(yǎng)基，若顏色不正確，通常是由于pH不正確導(dǎo)致的，加熱過度、錯(cuò)誤的滅菌方式等都會(huì)導(dǎo)致此項(xiàng)問題。

（2）加熱過度導(dǎo)致某些成分分解或糖焦化，如SC培養(yǎng)基(SC增菌液)加熱過度會(huì)變紅，含糖量高的培養(yǎng)基，加熱過度通常會(huì)出現(xiàn)顏色加深，呈焦糖色或棕褐色。

（3）某些成分變質(zhì)，如血液久置易變黑，制成的平板顏色偏棕黑色。

02 培養(yǎng)基不凝固或凝固性差

（1）顆粒培養(yǎng)基稱量錯(cuò)誤

（2）瓊脂分布不均勻

（3）培養(yǎng)基pH不正確

（4）培養(yǎng)基加熱過度

（5）瓊脂量不足

03 培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀

（1）某些培養(yǎng)基原本就含有不溶性沉淀，如TTB，MC培養(yǎng)基等，配方中含有大量不溶性碳酸鈣。

（2）滅菌前未充分溶解，若滅菌前溶解不充足，滅菌后就會(huì)出現(xiàn)大量沉淀。

（3）pH不正確，偏酸或偏堿都有可能使培養(yǎng)基中的部分金屬離子產(chǎn)生沉淀。

（4）水的純度不夠，天然水中含有較多的礦物鹽離子，若未除凈，則易與培養(yǎng)基中反應(yīng)生成沉淀。

（5）添加劑加入溫度不正確，卵黃、血液等對溫度敏感的添加成分，若加入時(shí)溫度過高或溫差過大，易出現(xiàn)凝塊。

（6）稱量錯(cuò)誤。

（7）試劑加入順序不正確。

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DO Supplement(四缺:Leu/Met/Trp/Ura)  Dropout Supplement -Leu/-Met/-Trp/-Ura  20g

注意事項(xiàng)：

1）培養(yǎng)基盡量使用新鮮培養(yǎng)基，2～4h內(nèi)用完；

2）上海應(yīng)使用預(yù)還原培養(yǎng)基，預(yù)還原24～48h更好；

3）可采用預(yù)還原滅菌法制作的培養(yǎng)基（用前于培養(yǎng)基中加入還原劑，如L-半胱氨酸、維生素C等，盡可能使預(yù)還原劑處于還原狀態(tài)）；

4）液體培養(yǎng)基應(yīng)煮沸10min，以驅(qū)除溶解氧，并迅速冷卻，立即接種醫(yī)。學(xué)教育網(wǎng)搜集整理；

5）厭氧菌的培養(yǎng)基均應(yīng)營養(yǎng)豐富，并加有還原劑與生長刺激因子（血清、維生素K、氯化血紅素、聚山梨酯-80等）。

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