產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品名稱：美洲四棱線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Tetrameres americana
產(chǎn)品貨號：LZ-P4108
規(guī)格：50T
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光。
有效期：一年
如何進(jìn)行 PCR 實(shí)驗？
一、準(zhǔn)備實(shí)驗材料（1）DNA模板：包含你想要復(fù)制的DNA區(qū)域。上海（2）引物：短的單鏈DNA片段，用于指導(dǎo)DNA合成的起始位置。（3）DNA聚合酶：一種酶，用于合成DNA。（4）四種脫氧核苷酸（dNTPs）：DNA的構(gòu)建塊。（5）緩沖液：提供適宜的反應(yīng)環(huán)境。（6）鎂離子或其它必需的離子：通常作為DNA聚合酶的輔助因子。二、設(shè)定反應(yīng)混合物將所有材料混合在微量離心管中?；旌衔锏目傮w積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序（1）將混合物放入PCR機(jī)（熱循環(huán)儀）中，并設(shè)定程序。PCR程序通常包括以下階段：（2）初次變性：加熱至94-98°C，持續(xù)幾分鐘，使DNA雙鏈解開成單鏈。（3）循環(huán)步驟（通常進(jìn)行30-40次循環(huán)）：（4）變性階段：加熱至94-98°C，持續(xù)20-30秒，使DNA雙鏈解開。（5）退火階段：降溫至50-65°C，持續(xù)20-40秒，允許引物與模板DNA結(jié)合。（6）延伸階段：加熱至72°C，持續(xù)1分鐘每1千個堿基，以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。（7）后延伸：在72°C下持續(xù)5-10分鐘，確保所有可用的DNA模板都被復(fù)制。（8）保持階段：將溫度降至4-15°C，直到用戶準(zhǔn)備取出樣品。
實(shí)驗步驟：
美洲四棱線蟲PCR一．樣品制備
1．PCR擴(kuò)增并檢測。根據(jù)不同的引物挑選適合的退火溫度進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測，上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。
2．PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液（變性緩沖液，同《分子克隆》中的測序緩沖液），然后在緩沖液中央加入PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗，擴(kuò)增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul，效果很好加0.5ul，如果不太好就適當(dāng)增加1.5、2或3不等，同時加大上樣緩沖液的量，比如加3ul的PCR產(chǎn)物，緩沖液加到8ul變性效果更好。
3．PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進(jìn)行離心，使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘，立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min，以免變性的產(chǎn)物復(fù)性。
PCR實(shí)驗的基本步驟：
DNA聚合酶是實(shí)驗室中常用的生物學(xué)酶之一，在PCR實(shí)驗中具有重要的作用。實(shí)驗室常用的DNA聚合酶，包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一Taq聚合酶：
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶，在分子生物學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性，可以在高溫條件下保持活性，這是由于其來源于熱液生物，能夠存活和正?；顒佑诟邷丨h(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）中起到關(guān)鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈，因此在PCR中用于擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。然而，Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性，導(dǎo)致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現(xiàn)額外的腺嘌呤堿基。因此，在某些應(yīng)用中，需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、美洲四棱線蟲試劑Pfu聚合酶：
Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比，Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色，其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應(yīng)的可靠性和準(zhǔn)確性。此外，Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性，可以修復(fù)并糾正PCR反應(yīng)中的腺嘌呤堿基誤配，有效防止誤差累積。因此，Pfu聚合酶適用于需要高度準(zhǔn)確的PCR擴(kuò)增和DNA測序。
三、Tth聚合酶：
Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同，Tth聚合酶具有熱活性反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶活性，可以將RNA模板合成相應(yīng)的DNA鏈。因此，Tth聚合酶在逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）中得到廣泛應(yīng)用，用于將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA，并通過增加熱活性酶來實(shí)現(xiàn)PCR擴(kuò)增。此外，Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性，可用于修復(fù)和校正PCR產(chǎn)物的末端。
呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒
體液總抗氧化能力（TAC）化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
石蠟切片組織PAR-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
A. fumigatus RFLP基因分析試劑盒
細(xì)胞甘肽過氧化物酶（GSH PX）活性酶動力比色法定量檢測試劑盒
體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性熒光定量檢測試劑盒
體液基質(zhì)金屬（MMP-2）活性熒光定量檢測試劑盒
體液酸性酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞羥賴（hydroxylisine）含量比色法定量檢測試劑盒
酵母菌SD-URA培養(yǎng)基（半乳糖）
食物D-葡萄糖氧化法定量檢測試劑盒
ADP核糖基化因子樣11抗體
APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體
E3泛素蛋白連接酶CHIP蛋白抗體
細(xì)胞分裂周期同源蛋白40抗體
11號染色體開放閱讀框71抗體
1號染色體開放閱讀框86抗體
尤文氏肉瘤相關(guān)EWS蛋白抗體
FbxW2蛋白抗體
銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體
慶大霉素抗體
美洲四棱線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒熱休克蛋白-47抗體
甲基檸檬酸合酶(MCS）試劑盒可見分光光度法
780元
產(chǎn)品名：甲基檸檬酸合酶,可見分光光度法,試劑盒
乙酰輔酶A試劑盒紫外分光光度法
780元
產(chǎn)品名：乙酰輔酶A試劑盒,紫外分光光度法,試劑盒
脂肪酸合成酶（FAS）試劑盒紫外分光光度法
780元
產(chǎn)品名：脂肪酸合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
線粒體檸檬酸(MCA）含量試劑盒紫外分光光度法
975元
產(chǎn)品名：線粒體檸檬酸,紫外分光光度法,試劑盒
酰基轉(zhuǎn)移酶（AAT）試劑盒可見分光光度法
1300元
產(chǎn)品名：?；D(zhuǎn)移酶,可見分光光度法,試劑盒
可溶性淀粉合成酶(SSS）試劑盒紫外分光光度法
1300元
產(chǎn)品名：可溶性淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS）試劑盒紫外分光光度法
1300元
產(chǎn)品名：結(jié)合態(tài)淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
NO含量試劑盒微量法
253.5元
產(chǎn)品名：NO含量,微量法,試劑盒