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ATCC（美國模式培養(yǎng)物集存庫）標準菌株的存儲條件通常取決于菌株的特性，但一般常見的存儲方法和條件如下：
1. 冷凍保存：
- 液氮（-196℃）：這是長期保存菌株的常用方法，能大程度保持菌株的活性和穩(wěn)定性。
- 低溫冰箱（-80℃）：也能有效保存菌株，但保存時間可能相對液氮較短。
2. 低溫冷藏：
- 一般在 2 - 8℃的冰箱中，適用于一些短期保存或對溫度要求不太高的菌株。
在存儲菌株時，通常會使用特定的保護劑，如甘油或脫脂牛奶等，以減少冷凍和復蘇過程對菌株的損傷。同時，菌株的保存容器要經(jīng)過嚴格的滅菌處理，并且做好標記和記錄，包括菌株的名稱、編號、保存日期等信息。
ATCC（美國模式培養(yǎng)物集存庫）的標準菌株安全等級因菌株的種類和特性而異。
一般來說，安全等級分為以下幾個級別：
1. 生物安全 1 級（BSL-1）：通常對健康成年人無致病風險，例如一些常見的非致病性微生物。
2. 生物安全 2 級（BSL-2）：能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不太可能引起嚴重危害。
3. 生物安全 3 級（BSL-3）：可通過吸入、攝入或經(jīng)皮膚接觸而引起嚴重的甚至是致命的疾病。
4. 生物安全 4 級（BSL-4）：對個體危險高、通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，尚無有效的或治療方法。
在使用 ATCC 標準菌株時，根據(jù)菌株的安全等級，在相應的生物安全防護條件下進行操作。
評估復合細胞模型穩(wěn)定性可從細胞特性、功能、分子水平及環(huán)境因素等方面進行，以下是具體的評估方法：
細胞特性評估
細胞形態(tài)觀察：通過顯微鏡定期觀察復合細胞模型中各種細胞的形態(tài)。如在腫瘤復合細胞模型中，觀察腫瘤細胞與基質細胞的形態(tài)是否保持典型特征，有無異常變化，若細胞形態(tài)穩(wěn)定，提示細胞模型在外觀上保持穩(wěn)定。
細胞生長曲線測定：繪制復合細胞模型中各類細胞的生長曲線，連續(xù)監(jiān)測細胞在不同時間點的數(shù)量變化。若生長曲線呈現(xiàn)穩(wěn)定的對數(shù)增長期、平臺期等特征，且多次重復實驗結果相似，說明細胞生長狀態(tài)穩(wěn)定，細胞模型在生長特性方面較為穩(wěn)定。
細胞活力檢測：采用臺盼藍染色、MTT 法、CCK - 8 法等檢測細胞活力。以 MTT 法為例，在相同培養(yǎng)條件下，定期檢測復合細胞模型中細胞的吸光度值，若吸光度值穩(wěn)定，表明細胞活力穩(wěn)定，細胞模型整體狀態(tài)穩(wěn)定。
細胞功能評估
特定功能檢測：依據(jù)復合細胞模型的類型和研究目的，檢測細胞的特定功能。如在肝臟復合細胞模型中，檢測肝細胞的代謝功能，包括對藥物、毒素的代謝轉化能力；在神經(jīng)細胞復合模型中，檢測神經(jīng)元的電生理活動，如動作電位的發(fā)放等，若這些功能指標在多次檢測中保持穩(wěn)定，說明細胞模型的功能穩(wěn)定。
細胞間相互作用監(jiān)測：觀察復合細胞模型中不同細胞間的相互作用。例如在腫瘤微環(huán)境復合細胞模型中，通過熒光染色等方法檢測腫瘤細胞與細胞之間的信號傳導分子表達情況，若細胞間相互作用的相關指標穩(wěn)定，表明細胞模型中細胞間的關系和功能穩(wěn)定。
分子水平評估
基因表達分析：運用實時定量 PCR、基因芯片等技術檢測與細胞功能、表型相關的關鍵基因表達水平。在心肌細胞復合模型中，檢測心肌特異性基因如肌鈣蛋白、肌球蛋白等的表達，若這些基因的表達量在一定范圍內波動且保持相對穩(wěn)定，說明細胞模型在基因表達層面穩(wěn)定。
蛋白質表達檢測：采用 Western blotting、組化等方法檢測關鍵蛋白質的表達和定位。在皮膚復合細胞模型中，檢測角蛋白、膠原蛋白等蛋白質的表達情況，若蛋白質表達水平和定位穩(wěn)定，反映出細胞模型在蛋白質水平的穩(wěn)定性。
環(huán)境因素評估
培養(yǎng)條件穩(wěn)定性：保持培養(yǎng)條件的一致性，包括培養(yǎng)基成分、溫度、濕度、氣體環(huán)境等。定期檢測培養(yǎng)箱的溫度、二氧化碳濃度等參數(shù)，確保其在設定范圍內波動，同時監(jiān)測培養(yǎng)基的 pH 值、營養(yǎng)成分含量等，若培養(yǎng)條件穩(wěn)定，有助于維持復合細胞模型的穩(wěn)定性。
批次間一致性：對于多次構建的復合細胞模型，進行批次間的比較分析。檢測不同批次細胞模型的細胞特性、功能、分子水平等指標，若各批次間的差異較小，說明細胞模型具有良好的批次間穩(wěn)定性，可重復性高。
