革蘭氏染色液培養(yǎng)基

貨號：LZ-PYJ3661

英文名稱：Gram Staining

產(chǎn)品規(guī)格：5mL*8

用途：用于細菌革蘭氏染色試驗

1.涂片經(jīng)火焰固定，加(結(jié)晶紫溶液)溶液A染1分鐘，用清水沖去染液。

2.加(液)溶液B染1分鐘，水洗。

3.加(脫色液)溶液C，不時搖動玻片約10-30秒，至無紫色脫落為止，水洗。

4.加溶液D，染1分鐘，水洗。

5.干后油鏡鏡檢。陽性菌呈紫色、陰性菌呈淡紅色。

配制過程中的常見問題分析：

01 培養(yǎng)基顏色不正確

（1）含有酸堿指示劑的培養(yǎng)基，若顏色不正確，通常是由于pH不正確導致的，加熱過度、錯誤的滅菌方式等都會導致此項問題。

（2）加熱過度導致某些成分分解或糖焦化，如SC培養(yǎng)基(SC增菌液)加熱過度會變紅，含糖量高的培養(yǎng)基，加熱過度通常會出現(xiàn)顏色加深，呈焦糖色或棕褐色。

（3）某些成分變質(zhì)，如血液久置易變黑，制成的平板顏色偏棕黑色。

02 培養(yǎng)基不凝固或凝固性差

（1）顆粒培養(yǎng)基稱量錯誤

（2）瓊脂分布不均勻

（3）培養(yǎng)基pH不正確

（4）培養(yǎng)基加熱過度

（5）瓊脂量不足

03 培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀

（1）某些培養(yǎng)基原本就含有不溶性沉淀，如TTB，MC培養(yǎng)基等，配方中含有大量不溶性碳酸鈣。

（2）滅菌前未充分溶解，若滅菌前溶解不充足，滅菌后就會出現(xiàn)大量沉淀。

（3）pH不正確，偏酸或偏堿都有可能使培養(yǎng)基中的部分金屬離子產(chǎn)生沉淀。

（4）水的純度不夠，天然水中含有較多的礦物鹽離子，若未除凈，則易與培養(yǎng)基中反應生成沉淀。

（5）添加劑加入溫度不正確，卵黃、血液等對溫度敏感的添加成分，若加入時溫度過高或溫差過大，易出現(xiàn)凝塊。

（6）稱量錯誤。

（7）試劑加入順序不正確。

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注意事項：

1）培養(yǎng)基盡量使用新鮮培養(yǎng)基，2～4h內(nèi)用完；

2）上海應使用預還原培養(yǎng)基，預還原24～48h更好；

3）可采用預還原滅菌法制作的培養(yǎng)基（用前于培養(yǎng)基中加入還原劑，如L-半胱氨酸、維生素C等，盡可能使預還原劑處于還原狀態(tài)）；

4）液體培養(yǎng)基應煮沸10min，以驅(qū)除溶解氧，并迅速冷卻，立即接種醫(yī)。學教育網(wǎng)搜集整理；

5）厭氧菌的培養(yǎng)基均應營養(yǎng)豐富，并加有還原劑與生長刺激因子（血清、維生素K、氯化血紅素、聚山梨酯-80等）。

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