山梨醇含量試劑盒可見分光光度法說明書
可見分光光度法 50管/48樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
產(chǎn)品名稱:山梨醇含量試劑盒可見分光光度法
貨號:LZ-S01237-A
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法:可見分光光度法
產(chǎn)品分類:糖代謝系列
發(fā)貨地:上海
測定意義:
山梨醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,不僅是糖運輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風味密切相關。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測山梨醇含量變化
測定原理:
山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍色絡合物,在 655nm 波長有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 10mL×1 瓶 ,4℃保存。
山梨醇的提?。?/span>
按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.2g 組織,加入 2mL蒸餾水),研磨成勻漿, 95℃水浴 10 分鐘(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心 10min,取上清液待測。
操作步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
生化檢測試劑盒常見問題:
在使用生化檢測試劑盒時,可能會遇到一系列常見問題,這些問題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實驗操作等方面。以下是一些常見的問題及其解決方法:
一、?測定原理?:生化試劑盒通過化學反應或酶促反應測定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計和酶標儀,它們的測定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動植物組織、血清、細胞細菌、食品等樣本均可進行測定?。
?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?:根據(jù)實驗的實際情況選擇合適的試劑盒。如果實驗室有酶標儀且具備檢測波長,可以選擇微量法試劑盒;如果有分光光度計及相應規(guī)格的比色皿,則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購買前仔細閱讀說明書,確認自備的儀器和試劑是否符合要求?。
?三、保存方法?:收到試劑盒后,如果暫時不用,應按照外包裝上指示的溫度保存。拆開包裝后,應按照每個試劑的保存溫度進行保存,注意有些試劑忌反復凍融,有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。
四、?有效期?:一般生化試劑盒的有效期為6個月,也有特殊貨號的有效期為1年。具體以實際收到貨物的標簽信息為準?1。
?五、樣本處理?:新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標的測定,但有些生理活性物質(zhì)容易降解,建議使用新鮮樣本測定。對于冷凍樣本,建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時間有所不同,例如4℃可保存一周,-20℃保存一個月,-80℃保存3個月?。
?六、土壤酶活性測定?:對于土壤酶活性的測定,建議將鮮土風干并過篩后取樣,以測定的重復性。若使用鮮土測定,需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。
七、?預測定?:在進行正式測定前,建議選擇2-3個預期結果差別較大的樣本做預實驗。通過預測定可以全面反映樣品特點、試劑質(zhì)量、儀器設備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性,確保正式測定結果真實可靠?。
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